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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » RCA实验
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xiamuxi

新虫 (小有名气)

[求助] RCA实验 已有3人参与

请问谁做过RCA（滚环扩增）实验吗？我扩增的DNA模板GC含量太高，NEB公司出的phi29DNA聚合酶有几款针对高GC模板的Buffer，不知道选哪种呢？有知情的能不能帮我分析下？http://www.neb-china.com/pshow.asp?id=3180
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生活需要信仰。
1楼 2016-07-19 11:24:03
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介空

金虫 (初入文坛)

笨鸟

【答案】应助回帖

phi29,我用这个扩增的，电泳可看见扩增条带
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从一跳到另一个坑，现在努力把自己埋了个坑
2楼2016-10-08 10:48:59
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jindiao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Phi29聚合酶似乎对于GC含量和重复片段都不怎么挑啊。而且据我所知NEB只提供一种缓冲液的。楼主所提供的那些缓冲液是似乎是用于PCR的DNA聚合酶的。和Phi29聚合酶是不一样的。
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3楼2016-10-09 19:55:52
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫

【答案】应助回帖

我问了下我们实验室的人，他们说买这个酶就是附带一种特定缓冲液的，没这么多选择，你可以参考下phi29酶的说明书，有其反应缓冲液的成分，参考下。
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学习，交流
4楼2016-10-10 11:38:02
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