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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 我有一个质粒提取的问题请教一下各位大神。
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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)

[求助] 我有一个质粒提取的问题请教一下各位大神。 已有2人参与

我有一个质粒提取的问题请教一下各位大神。
质粒是pCre，就是将Cre重组酶导入。
该质粒是卡那霉素抗性的。在用不去除内毒素的盒子提取十分正常。而同一批质粒用去内毒素的盒子提取总是浓度不高。有时候甚至提不出来。用同样的盒子提取其他质粒，同一批实验做没有任何问题。请问这个是什么原因呢？该质粒拷贝数也属于比较低的那种。请教大神该如何是好？？？谢谢
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1楼 2016-07-18 15:20:02
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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by KKHYYc at 2016-08-03 19:05:17
什么牌子的盒子呢？我们用的是Omega的，一直都很正常啊，你说的情况不应该出现的。

我也是我用的omega的没错。

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当裤子失去皮带，才知道什么叫依赖
4楼2016-08-07 15:22:59
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kan抗性的一般是中低拷贝质粒，提取的浓度低属正常，再加上去内毒的一步，试剂盒不好的话可能会损失不少。
提取这个质粒不行，这个结论需要慎重。
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2楼2016-07-19 10:15:15
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KKHYYc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

什么牌子的盒子呢？我们用的是Omega的，一直都很正常啊，你说的情况不应该出现的。
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3楼2016-08-03 19:05:17
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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gongeleven at 2016-07-19 10:15:15
kan抗性的一般是中低拷贝质粒，提取的浓度低属正常，再加上去内毒的一步，试剂盒不好的话可能会损失不少。
提取这个质粒不行，这个结论需要慎重。

做了很多次，大概两个多月吧。也做了阳性对照。确实提不出来。浓度都是10ng/ul这样的。
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当裤子失去皮带，才知道什么叫依赖
5楼2016-09-09 10:41:54
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