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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)

[求助] 我有一个质粒提取的问题请教一下各位大神。 已有2人参与

我有一个质粒提取的问题请教一下各位大神。
质粒是pCre,就是将Cre重组酶导入。
该质粒是卡那霉素抗性的。在用不去除内毒素的盒子提取十分正常。而同一批质粒用去内毒素的盒子提取总是浓度不高。有时候甚至提不出来。用同样的盒子提取其他质粒,同一批实验做没有任何问题。请问这个是什么原因呢?该质粒拷贝数也属于比较低的那种。请教大神该如何是好???谢谢
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
kan抗性的一般是中低拷贝质粒,提取的浓度低属正常,再加上去内毒的一步,试剂盒不好的话可能会损失不少。
提取这个质粒不行,这个结论需要慎重。
2楼2016-07-19 10:15:15
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KKHYYc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

什么牌子的盒子呢?我们用的是Omega的,一直都很正常啊,你说的情况不应该出现的。
3楼2016-08-03 19:05:17
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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by KKHYYc at 2016-08-03 19:05:17
什么牌子的盒子呢?我们用的是Omega的,一直都很正常啊,你说的情况不应该出现的。

我也是我用的omega的没错。

发自小木虫Android客户端
当裤子失去皮带,才知道什么叫依赖
4楼2016-08-07 15:22:59
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wjqfeixiang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gongeleven at 2016-07-19 10:15:15
kan抗性的一般是中低拷贝质粒,提取的浓度低属正常,再加上去内毒的一步,试剂盒不好的话可能会损失不少。
提取这个质粒不行,这个结论需要慎重。

做了很多次,大概两个多月吧。也做了阳性对照。确实提不出来。浓度都是10ng/ul这样的。
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5楼2016-09-09 10:41:54
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