| 查看: 825 | 回复: 2 | |||
张红燕Sarah新虫 (初入文坛)
|
[交流]
蛋白质胶上酶解
|
|
最近在做蛋白质胶上酶解，有几个问题提出来请教大家 1）蛋白质的胶上酶解效率做到多少比较合适？ 我用BSA试过，胶上酶解效率为46%，据说要做到>80%才是正常的，本宝宝真的做不到，我用的是Mann的Nature protocol（2006）的方法，对考染的band做胶上酶解，不知道大家都是怎么做的，酶解效率能做到多少。 2）band单独分析，还是混合分析（此处分析指的是后续的LC-MS分析）？ 切下来的band比较多，混合分析的话就会很快；单独分析对后续的LC-MS分析很有压力，但是当band之间丰度差异比较大时，单独分析鉴定的蛋白会更多。 大家平时是怎么做的呢？ 3）每个band单独分析，鉴定的蛋白质分子量和凝胶电泳的不匹配 就比如，我切的胶是130-170kDa之间的，结果质谱鉴定的蛋白有46kDa的；72-95kDa之间的band，鉴定到了168kDa的蛋白。这是正常现象吗？ 希望得到各位同仁的帮助  ~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线
已经有6人回复
-
085600 材料与化工 329分求调剂
已经有9人回复
-
一志愿厦门大学化学学硕307求调剂
已经有3人回复
-
315分求调剂
已经有4人回复
-
化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211
已经有4人回复
-
总分293求调剂
已经有7人回复
-
环境专硕324分求调剂推荐
已经有3人回复
-
284求调剂
已经有3人回复
-
北京林业大学硕导招生广告
已经有6人回复
-
0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
jiafeijiafei
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1081.7
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 143
- 在线: 41.8小时
- 虫号: 4783202
- 注册: 2016-06-19
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
2楼2016-08-26 17:21:47
张红燕Sarah
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2513.5
- 散金: 12
- 红花: 1
- 帖子: 41
- 在线: 60.3小时
- 虫号: 2097147
- 注册: 2012-10-31
- 专业: 蛋白质组学
3楼2016-08-26 20:10:58
