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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌体转到TB中长两小时就没了
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

[交流] 菌体转到TB中长两小时就没了

小弟最近重组构建了一株菌，载体是pET-28a。测序成功的，转到DE3后，挑菌，诱导正常。最近一次挑菌到LB中生长正常，按1%的量转到TB后，长到OD为1之后，就没有了，测OD只有0.00几。最诡异的是，有次同一个LB中的菌，转到TB诱导后，有一瓶生长正常，一瓶也是长着长着没了。。。。。求大神解答，这到底怎么回事

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1楼 2016-07-08 16:00:52
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)
转到TB诱导，有的正常，有的长一会就没了。TB是同一批，这怎么了

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2楼2016-07-08 16:02:14
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)
有没有谁遇到过这种情况，挺老师说可能是菌体长老了

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3楼2016-07-08 17:45:46
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★
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也有可能是质粒丢失了。
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4楼2016-07-08 20:58:40
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-07-08 20:58:40
也有可能是质粒丢失了。

谢谢了，考虑过这个问题。体质验证是对的。然后划线重新做，转到TB后，还是有的长，有的不长。

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5楼2016-07-09 08:13:38
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安静de执着14

新虫 (著名写手)
★
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有没有可能污染噬菌体？

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6楼2016-07-09 08:33:29
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2016-07-09 08:33:29
有没有可能污染噬菌体？

污染噬菌体应该在LB中不长吧！但是在LB中正常，转到TB后，开始可以看到菌体增多，培养两个小时候后吧，菌就几乎没了。我感觉可能是tb有问题，但是有其他几瓶长的好好的。所以现在找不到原因。我想问下，菌长一会之后越长越少了，是什么原因呢？

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7楼2016-07-09 08:45:11
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lxzk

木虫 (正式写手)
★
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我觉得还是噬菌体污染，曾经遇到过试管里正常，放大就跟你的一样消失，培养基都一样。
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8楼2016-07-12 01:02:09
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