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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

[交流] 菌体转到TB中长两小时就没了

小弟最近重组构建了一株菌,载体是pET-28a。测序成功的,转到DE3后,挑菌,诱导正常。最近一次挑菌到LB中生长正常,按1%的量转到TB后,长到OD为1之后,就没有了,测OD只有0.00几。最诡异的是,有次同一个LB中的菌,转到TB诱导后,有一瓶生长正常,一瓶也是长着长着没了。。。。。求大神解答,这到底怎么回事

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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

转到TB诱导,有的正常,有的长一会就没了。TB是同一批,这怎么了

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2楼2016-07-08 16:02:14
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

有没有谁遇到过这种情况,挺老师说可能是菌体长老了

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3楼2016-07-08 17:45:46
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kaobo2012

木虫 (正式写手)


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也有可能是质粒丢失了。
4楼2016-07-08 20:58:40
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-07-08 20:58:40
也有可能是质粒丢失了。

谢谢了,考虑过这个问题。体质验证是对的。然后划线重新做,转到TB后,还是有的长,有的不长。

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5楼2016-07-09 08:13:38
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安静de执着14

新虫 (著名写手)


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有没有可能污染噬菌体?

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6楼2016-07-09 08:33:29
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一只毛毛虫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2016-07-09 08:33:29
有没有可能污染噬菌体?

污染噬菌体应该在LB中不长吧!但是在LB中正常,转到TB后,开始可以看到菌体增多,培养两个小时候后吧,菌就几乎没了。我感觉可能是tb有问题,但是有其他几瓶长的好好的。所以现在找不到原因。我想问下,菌长一会之后越长越少了,是什么原因呢?

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7楼2016-07-09 08:45:11
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lxzk

木虫 (正式写手)


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我觉得还是噬菌体污染,曾经遇到过试管里正常,放大就跟你的一样消失,培养基都一样。
8楼2016-07-12 01:02:09
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