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菜大湿

木虫 (初入文坛)

[求助] 小弟是做HPLC的新手,有几个关于调PH的问题求指教! 已有3人参与

1、流动相需要调PH值吗?
2、流动相用的是甲醇和水,要调PH的话是两个都要调吗?
3、PH值大概要到什么范围?
请各位指点!
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。。。。。。
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月旭-小G

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1、流动相需要调PH值吗?
   这个其实需要根据您需要测定物质的PKA值来确定,一般中性物质不需要控制PH值,因为PH值的调整对目标物的影响不大。一般调PH值就是为了让目标物呈分子状态,加强保留,比如酸性物质,如果不控制PH,目标物会呈现离子状态,在柱子中的保留就会变弱,一般流动相向酸性调,目标物的保留会加强,向碱性调,目标物的保留会减弱,碱性物质刚好相反。但是硅胶的特性是不耐碱,所以现在比较多的碱性物质也是在酸性流动相下检测的。
2、流动相用的是甲醇和水,要调PH的话是两个都要调吗?
  我们PH值一般都是通过PH计来测定的,我们就要了解PH计的原理,所以为了更准确的有一个PH值,我们一般都是调水相的PH值,因为有机相PH值测定不准。
3、PH值大概要到什么范围?
    刚才也说过硅胶不耐碱性,所以常规的这些C18柱,我们一般控制PH值在2~8,低于2时,溶液出现键合相脱落,其实PH高于6.5以后的磷酸盐的话,柱子寿命都不好。
10楼2016-07-11 20:30:03
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-lizi

新虫 (正式写手)

如果流动相就是甲醇和水,不需要调节ph,需要调节的,方法上会说明的

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-07-08 10:12:09
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菜大湿

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by -lizi at 2016-07-08 10:12:09
如果流动相就是甲醇和水,不需要调节ph,需要调节的,方法上会说明的

我在网上查到如果把PH值调小,出峰时间会提前,这是真的吗?
。。。。。。
3楼2016-07-08 10:27:16
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-lizi

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 菜大湿 at 2016-07-08 10:27:16
我在网上查到如果把PH值调小,出峰时间会提前,这是真的吗?...

按照方法来,不要自己调节ph,ph过低过高会对柱子有影响。出峰时间跟很多因素有关,柱子不一样,短柱长柱,柱温以及流动相比例等。

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-07-08 10:46:57
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