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小弟是做HPLC的新手，有几个关于调PH的问题求指教！已有3人参与
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1、流动相需要调PH值吗？ 2、流动相用的是甲醇和水，要调PH的话是两个都要调吗？ 3、PH值大概要到什么范围？ 请各位指点！ |
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2楼2016-07-08 10:12:09
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4楼2016-07-08 10:46:57
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zhangh62
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9楼2016-07-11 10:01:45
【答案】应助回帖
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1、流动相需要调PH值吗？ 这个其实需要根据您需要测定物质的PKA值来确定，一般中性物质不需要控制PH值，因为PH值的调整对目标物的影响不大。一般调PH值就是为了让目标物呈分子状态，加强保留，比如酸性物质，如果不控制PH，目标物会呈现离子状态，在柱子中的保留就会变弱，一般流动相向酸性调，目标物的保留会加强，向碱性调，目标物的保留会减弱，碱性物质刚好相反。但是硅胶的特性是不耐碱，所以现在比较多的碱性物质也是在酸性流动相下检测的。 2、流动相用的是甲醇和水，要调PH的话是两个都要调吗？ 我们PH值一般都是通过PH计来测定的，我们就要了解PH计的原理，所以为了更准确的有一个PH值，我们一般都是调水相的PH值，因为有机相PH值测定不准。 3、PH值大概要到什么范围？ 刚才也说过硅胶不耐碱性，所以常规的这些C18柱，我们一般控制PH值在2~8，低于2时，溶液出现键合相脱落，其实PH高于6.5以后的磷酸盐的话，柱子寿命都不好。 |
10楼2016-07-11 20:30:03