| 查看: 2078 | 回复: 6 | ||
sdjnyxn123银虫 (小有名气)
|
[求助]
请问我的SDS-PAGE每次条带都跑得歪歪扭扭是怎么回事
|
 像图里的一样，都歪歪扭扭成那样了，把Marker都快挤成一条线了 我是25uL样品+25uL上样缓冲液煮沸 然后点样的时候取30uL上样 marker上样10uL 是因为点样点多了吗？ 几乎每次都跑成这个样子 另外有没有比较好的脱色液配方 我一直用120mL水+60mL甲醇+20mL乙酸脱色 一般要过夜才能脱得差不多 有时候还脱得不够，胶还是比较泛蓝色 有没有比较好的方法解决呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有139人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
2楼2016-07-07 20:44:13
3楼2016-07-07 20:57:20
凯伦爱佳佳
金虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 1571.1
- 散金: 97
- 红花: 1
- 帖子: 321
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 3487227
- 注册: 2014-10-20
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
【答案】应助回帖
★
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-09 08:02:43
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-09 08:02:43
|
marker和上样液体积差太多了，体积不同会造成你这种情况，你可以酌情考虑。另外你可以减少染色的时间啊，这样脱色就不需要那么长时间咯 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-07-09 01:33:35
zxp466561162
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 298.6
- 帖子: 237
- 在线: 55.5小时
- 虫号: 4746532
- 注册: 2016-06-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2016-07-09 10:36:23
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
|
试一下在两边分别加30的loading buffer，maker孔也加loadingbuffer补齐。总之，所有孔的上样体积一样，且两边各加一个额外只有buffer的孔 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-07-12 09:02:47
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
|
此外，上样体积可以减少，明显你这图的蛋白量很高。sds-page能够检测到100ng的蛋白，所以放心的减少。想必第一个是包涵体，第二个是上清。pet系统有一个上样量的计算公式，你可以按照公式进行计算 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-07-12 09:05:50