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洛一7轮

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,为什么我的DNA电泳一直失败 已有3人参与

是DNA降解了,还是退火温度过低,还是胶的问题。第二天跑,有条带了,但不是我想要的条带。
dna是水煮法提的,pcr是2*Taq,模板,上下引和dd水。变性95度5分钟,退火58度,延伸72度。电泳胶1.5%琼脂糖,dna大小200到500bp,电压90v。
不知道问题出在哪,求大神帮助我这个初入生物分子的人

求助,为什么我的DNA电泳一直失败


求助,为什么我的DNA电泳一直失败-1


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
水煮法提取的DNA纯度不好,做PCR肯定有影响,另外看你的图,引物二聚体比较严重,另外,你制备的琼脂糖凝胶也有问题。
9楼2016-07-05 17:12:25
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 洛一7轮 at 2016-07-05 18:48:51
具体能改善吗
...

不知道你是什么材料?可以换用其他的方法提取DNA,制胶时使用新配的TAE或TBE电泳缓冲液,加热时要多沸腾几次,保证琼脂糖充分溶解。电泳时也使用新配的电泳缓冲液。
12楼2016-07-05 19:19:53
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