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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教大家，我现在用PCR方法检测出了纯净水中有沙门杆菌的存在，请问可能吗？
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 请教大家，我现在用PCR方法检测出了纯净水中有沙门杆菌的存在，请问可能吗？ 已有1人参与

我现在用PCR方法检测出了纯净水中有沙门杆菌的存在，请问可能吗？
如题，恳请大家帮助！
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1楼 2016-07-05 10:56:19
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-06 09:47:38
平板培养没做过，只是用水做模板，做了个阴性对照试验，结果是阳性的。后来纯化连接测序，有的是沙门菌。所以就不知道怎么办了
也考虑是否是样品污染导致的。
补充一下，纯净水是Mili-Q过滤的。...

Mili-Q过滤的超纯水，按理说不应该有菌的存在（仪器正常的话）。建议两个实验：1）拿水做平板培养，有菌的话说明仪器出了问题，这个很简单，也快；2）如果实验证明无菌，那么用蒸馏水作对照，如果纯净水还能有PCR产物的话，那么可能是水源和仪器确实出了问题。我们平时用双蒸水，即使用去离子水，哪怕是自来水，想有PCR产物还是很难的，毕竟样本中DNA量还是太少。看你的实验结果，极有可能是纯水机出问题或生物材料被污染了。
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雨儿天0320
一品黄山
8楼2016-07-06 12:05:31
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普通回帖

许彦

木虫 (正式写手)
有可能啊 你使用的是普通PCR还是实时荧光
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2楼2016-07-05 13:05:03
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2016-07-05 13:05:03
有可能啊 你使用的是普通PCR还是实时荧光

普通PCR，可是这要是用来做微生物定性实验，水是必备的啊，怎么办
谢谢
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3楼2016-07-05 15:24:46
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+15, ★★★很有帮助 2016-07-06 09:44:39
不知道你所谓的PCR方法检测是怎么个做法？没有做菌种分离和培养说明不了问题。沙门杆菌是可能出现，但在纯净水中出现的可能不大，要不问题就大了。当然，不知道你的纯净水是哪里来的？
如果真想确认，建议把你用的水进行微滤，甚至超滤，然后再PCR验证。另外，只有拿水做纯种培养，能分离出沙门杆菌，才真正说明结果。
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一品黄山
4楼2016-07-05 17:14:04
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许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-05 15:24:46
普通PCR，可是这要是用来做微生物定性实验，水是必备的啊，怎么办
谢谢...

就是现在有没有可能是你实验污染了，需不需要用别得方法学确认。确定是不是水污染。
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5楼2016-07-05 17:29:56
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2016-07-05 17:14:04
不知道你所谓的PCR方法检测是怎么个做法？没有做菌种分离和培养说明不了问题。沙门杆菌是可能出现，但在纯净水中出现的可能不大，要不问题就大了。当然，不知道你的纯净水是哪里来的？
如果真想确认，建议把你用的 ...

平板培养没做过，只是用水做模板，做了个阴性对照试验，结果是阳性的。后来纯化连接测序，有的是沙门菌。所以就不知道怎么办了
也考虑是否是样品污染导致的。
补充一下，纯净水是Mili-Q过滤的。
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6楼2016-07-06 09:47:38
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 许彦 at 2016-07-05 17:29:56
就是现在有没有可能是你实验污染了，需不需要用别得方法学确认。确定是不是水污染。...

恩，我也不太确定，再思考怎么做
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7楼2016-07-06 09:48:37
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许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-06 09:48:37
恩，我也不太确定，再思考怎么做...

你们实验室有实时荧光pcr仪吗？
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9楼2016-07-06 13:20:13
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by ls2046 at 2016-07-06 12:05:31
Mili-Q过滤的超纯水，按理说不应该有菌的存在（仪器正常的话）。建议两个实验：1）拿水做平板培养，有菌的话说明仪器出了问题，这个很简单，也快；2）如果实验证明无菌，那么用蒸馏水作对照，如果纯净水还能有PCR产 ...

非常感谢
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10楼2016-07-07 11:15:29
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