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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 请教大家,我现在用PCR方法检测出了纯净水中有沙门杆菌的存在,请问可能吗? 已有1人参与

我现在用PCR方法检测出了纯净水中有沙门杆菌的存在,请问可能吗?
如题,恳请大家帮助!
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-06 09:47:38
平板培养没做过,只是用水做模板,做了个阴性对照试验,结果是阳性的。后来纯化连接测序,有的是沙门菌。所以就不知道怎么办了
也考虑是否是样品污染导致的。
补充一下,纯净水是Mili-Q过滤的。...

Mili-Q过滤的超纯水,按理说不应该有菌的存在(仪器正常的话)。建议两个实验:1)拿水做平板培养,有菌的话说明仪器出了问题,这个很简单,也快;2)如果实验证明无菌,那么用蒸馏水作对照,如果纯净水还能有PCR产物的话,那么可能是水源和仪器确实出了问题。我们平时用双蒸水,即使用去离子水,哪怕是自来水,想有PCR产物还是很难的,毕竟样本中DNA量还是太少。看你的实验结果,极有可能是纯水机出问题或生物材料被污染了。

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一品黄山
8楼2016-07-06 12:05:31
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普通回帖

许彦

木虫 (正式写手)

有可能啊 你使用的是普通PCR还是实时荧光
2楼2016-07-05 13:05:03
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2016-07-05 13:05:03
有可能啊 你使用的是普通PCR还是实时荧光

普通PCR,可是这要是用来做微生物定性实验,水是必备的啊,怎么办
谢谢
3楼2016-07-05 15:24:46
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+15, ★★★很有帮助 2016-07-06 09:44:39
不知道你所谓的PCR方法检测是怎么个做法?没有做菌种分离和培养说明不了问题。沙门杆菌是可能出现,但在纯净水中出现的可能不大,要不问题就大了。当然,不知道你的纯净水是哪里来的?
如果真想确认,建议把你用的水进行微滤,甚至超滤,然后再PCR验证。另外,只有拿水做纯种培养,能分离出沙门杆菌,才真正说明结果。
一品黄山
4楼2016-07-05 17:14:04
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许彦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-05 15:24:46
普通PCR,可是这要是用来做微生物定性实验,水是必备的啊,怎么办
谢谢...

就是现在有没有可能是你实验污染了,需不需要用别得方法学确认。确定是不是水污染。
5楼2016-07-05 17:29:56
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2016-07-05 17:14:04
不知道你所谓的PCR方法检测是怎么个做法?没有做菌种分离和培养说明不了问题。沙门杆菌是可能出现,但在纯净水中出现的可能不大,要不问题就大了。当然,不知道你的纯净水是哪里来的?
如果真想确认,建议把你用的 ...

平板培养没做过,只是用水做模板,做了个阴性对照试验,结果是阳性的。后来纯化连接测序,有的是沙门菌。所以就不知道怎么办了
也考虑是否是样品污染导致的。
补充一下,纯净水是Mili-Q过滤的。
6楼2016-07-06 09:47:38
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 许彦 at 2016-07-05 17:29:56
就是现在有没有可能是你实验污染了,需不需要用别得方法学确认。确定是不是水污染。...

恩,我也不太确定,再思考怎么做
7楼2016-07-06 09:48:37
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许彦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-07-06 09:48:37
恩,我也不太确定,再思考怎么做...

你们实验室有实时荧光pcr仪吗?
9楼2016-07-06 13:20:13
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by ls2046 at 2016-07-06 12:05:31
Mili-Q过滤的超纯水,按理说不应该有菌的存在(仪器正常的话)。建议两个实验:1)拿水做平板培养,有菌的话说明仪器出了问题,这个很简单,也快;2)如果实验证明无菌,那么用蒸馏水作对照,如果纯净水还能有PCR产 ...

非常感谢
10楼2016-07-07 11:15:29
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