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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA Walking出现滑稽的结果
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朱庆平

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA Walking出现滑稽的结果

最近在做植物的DNA Walking，以期找出目的基因的5‘端。第一次做，P出了一个600bp左右的片段，经过测序比对，确定结果是正确的。但是由于我这个基因比较长，我觉得600bp的长度是不够的，然后就又根据这600bp的序列来设计出三个引物来继续Walking，这时候出现了2kb和1kb和单一的条带，欣喜之余送去测序。拿到测序结果后，却令人失望，与我原先已有的序列对不上无法拼接；后来我自己慢慢捣鼓，居然发现了一个很滑稽的结果：原来我的基因特异性引物GSP居然充当了扩增出片段的上下游引物，一个引物居然起到了两种引物的作用，而走Walking所用的随机引物并没有出现在所扩增出来的片段中。
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1楼 2016-06-29 11:01:18
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luoruf

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主祝福多多
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4楼2016-06-29 12:16:01
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xiaochaos

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
楼主好运，加油
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5楼2016-06-29 12:25:14
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liangqinc

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
加油楼主
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6楼2016-06-29 12:25:22
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xuzhaof

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
想什么有什么 加油
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8楼2016-06-29 12:27:41
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litiaot

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
好人好运
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9楼2016-06-29 12:28:02
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xiaohuank

银虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
美好的祝福送给你
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10楼2016-06-29 12:28:42
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heniulx

金虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
帮忙支持一下！
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11楼2016-06-29 12:30:45
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shangxiangp

金虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
顶一下.....
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12楼2016-06-29 12:30:47
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qiaoliv

新虫 (著名写手)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主祝福多多
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13楼2016-06-29 12:37:35
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shaizdon

银虫 (小有名气)
★
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
美好的祝福送给你
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14楼2016-06-29 12:38:13
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这很正常啊，重新设计引物继续整

发自小木虫Android客户端
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23楼2016-06-29 14:43:15
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朱庆平

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by Neo2000 at 2016-06-29 14:43:15
这很正常啊，重新设计引物继续整

哥，能给点建议不？
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24楼2016-06-29 16:17:24
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poppinzyoung

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，你设计的引物如何设计的，是在已知序列设计上下游引物吗？
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25楼2019-02-25 08:34:10
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tzynew2楼
2016-06-29 11:51   回复  
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xhmaohan3楼
2016-06-29 12:14   回复  
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hbl2157楼
2016-06-29 12:27   回复  
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祝福
skyish15楼
2016-06-29 12:38   回复  
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psylhh16楼
2016-06-29 12:39   回复  
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jyjydd17楼
2016-06-29 12:41   回复  
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8
virologik18楼
2016-06-29 12:43   回复  
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
世界只因有你19楼
2016-06-29 12:43   回复  
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
cdkzkfwrsr20楼
2016-06-29 12:44   回复  
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
祝福
fdzjm21楼
2016-06-29 12:53   回复  
朱庆平(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
shenrenren22楼
2016-06-29 12:55   回复  
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