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都没有77

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于SDS-PAGE电泳,跑完胶以后银染的问题 已有2人参与

求助:小硕一枚,一不小心走上了生物化学结合的不归路,现在有点走不下去了,求指点!!图中泳道除了第一个是Marker,其余全是纯的加完DTT的1倍上样液,不含蛋白,但是染出来在66kD的地方还是有齐整的二条细带,照理说纯的1*B跑出来的带应该是干净的。换过银染用的所有试剂,还是有,只有不加DTT时候没有66kD处的杂带的。求指点

关于SDS-PAGE电泳,跑完胶以后银染的问题
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都没有77

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by keke226 at 2016-06-28 19:45:56
每次跑电泳的内槽液是不是新的?...

是的,配好的5倍甘氨酸缓冲液,每次取出适量稀释,用完一次就扔了
5楼2016-06-28 20:57:20
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DTT被蛋白污染了?换个新的DTT试试。
读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
2楼2016-06-28 17:25:09
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都没有77

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by keke226 at 2016-06-28 17:25:09
DTT被蛋白污染了?换个新的DTT试试。

换过新买的DTT,还是那样。试过买来的商品化的5倍上样液,也有自己配的1倍上样液,还有Marker里自带的1倍上样液,都是那样
3楼2016-06-28 17:47:14
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 都没有77 at 2016-06-28 17:47:14
换过新买的DTT,还是那样。试过买来的商品化的5倍上样液,也有自己配的1倍上样液,还有Marker里自带的1倍上样液,都是那样...

每次跑电泳的内槽液是不是新的?
读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
4楼2016-06-28 19:45:56
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