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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » DNA老是不能大量的连到纳米金胶上去
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试管杨

新虫 (小有名气)

[求助] DNA老是不能大量的连到纳米金胶上去 已有1人参与

各位，虫友，最近花了近50几天，用DNA连金一直出问题老连不上。所以想咨询各位虫友意见！
我目标是在金表面连上一个双链DNA，其中一条一端连金，另一条在远离金一端标记荧光基团，所以如果连上就有荧光
我的实验步骤：首先将50uL 10uMDNA用5uL 10mMTCEP活化2小时，然后将其和1mL金胶一同加入NaOH处理过的玻璃瓶中，然后在避光的条件下在摇床上摇晃16h，温度37℃，然后，向反应瓶中加入0.1M PB、0.1%SDS使其浓度达到0.01M PB、0.01%SDS。然后，隔2h逐滴加入2M NaCl溶液时玻璃瓶中NaCl浓度达到0.05M，然后，每隔6-8h滴加2M NaCl溶液，使NaCl浓度达到0.1M、0.2M、0.3M. 然后在8500转（离心力在5500g）下离心25min，然后用0.3M NaCl的0.01M PB进行洗涤，重复三次，最后用1ml 0.3M NaCl的0.01M PBS进行溶解，然后和目标链在70度下保持10min中，然后缓慢将至室温，然后静置12h。最后8500转（离心力在5500g）下离心25min，最后用1ml 0.3M NaCl的0.01M PBS进行溶解。然后用荧光测定，发现荧光量很小。所以，几乎链接DNA很少。
求问：这问题出在哪里？

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-06-24 00:10:59
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试管杨

新虫 (小有名气)
顶上去

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2楼2016-06-24 19:21:45
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试管杨

新虫 (小有名气)
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3楼2016-06-27 17:18:22
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accalia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 试管杨 at 2016-06-27 17:18:22
顶上去

你好 请问您问题解决了吗？
是不是互补链序列太短？
你是怎么解决了这个问题？
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4楼2016-11-08 14:09:13
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范一一

新虫 (初入文坛)
请问问题如何解决的呀，我也遇到同样问题
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5楼2017-02-10 16:13:24
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