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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 绿原酸对照品
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yuwenxiao

新虫 (初入文坛)

[求助] 绿原酸对照品 已有4人参与

有没有用过绿原酸对照品的同学？液相检测时出峰数是一个吗？我用的是乙睛和0.4%磷酸水做流动相，梯度洗脱，怎么目标峰之前还连着一个峰呢，请有经验的筒子们给分析一下，是什么原因？是对照品自身问题还是流动相不合适？做过的同学们有没有出现类似的情况？绿原酸稳不稳定？

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1楼 2016-06-23 23:39:29
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yuwenxiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-06-26 20:38:21
绿原酸发生顺反异构的可能性比较小，我们检测这个对照品一直都是一个峰，如果对照品没有问题的话，你考虑你溶解对照品所用的溶剂是不是和你流动相的起始比例一致？如果极性差别很大，就容易出现你说的那种情况

我们是用甲醇溶解的，流动相起始比例是乙腈-磷酸水（5:95），后来我们试了用水、流动相、50%甲醇溶解都没有前面那个峰，但这个什么原因呢？问了安捷伦工程师说是溶剂效应造成的，这样解释能解释的通吗？还劳烦有经验的筒子们来给个明确的解释
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8楼2016-06-28 09:57:19
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuwenxiao: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-06-24 12:31:02
对照品自身问题，绿原酸结构中的咖啡酰基在溶液中会发生双键E/Z互变平衡。
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2楼2016-06-24 09:01:55
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yuwenxiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangfei.ac at 2016-06-24 09:01:55
对照品自身问题，绿原酸结构中的咖啡酰基在溶液中会发生双键E/Z互变平衡。

多谢大侠回复！这是新开封的对照品配制的溶液啊，我看文献上和有的人做的实验就是单独一个峰呢，这是什么原因造成的呢
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3楼2016-06-24 12:30:09
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
绿原酸发生顺反异构的可能性比较小，我们检测这个对照品一直都是一个峰，如果对照品没有问题的话，你考虑你溶解对照品所用的溶剂是不是和你流动相的起始比例一致？如果极性差别很大，就容易出现你说的那种情况
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4楼2016-06-26 20:38:21
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)
楼上说的也有可能，因绿原酸极性大，在反相材料上吸附力弱，建议用水溶解HPLC样品且浓度不宜高，看看情况是否得到改善。
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5楼2016-06-27 08:30:32
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杨子沁

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们一直在做绿原酸的实验，不会的。对照，溶剂，流动相，柱子可以挨个排除一下。

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没有不可以
6楼2016-06-27 19:22:38
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

也许样品浓度过大，或者柱子有问题。可以先减少进样量试一试，或者需要加点酸
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7楼2016-06-27 19:39:37
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yuwenxiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 杨子沁 at 2016-06-27 19:22:38
我们一直在做绿原酸的实验，不会的。对照，溶剂，流动相，柱子可以挨个排除一下。

你们是用什么试剂溶解的对照品呢？
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9楼2016-06-28 09:58:20
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

★ ★
yuwenxiao: 金币+2, ★★★很有帮助, 流动相起始比例是乙腈-磷酸水（5:95），如果用甲醇溶解样品的话是因为二者极性相差太大的原因吗？具体是怎么个过程和理论，本人理论知识太薄弱，还请多指教。 2016-06-28 11:43:49
引用回帖:
8楼: Originally posted by yuwenxiao at 2016-06-28 09:57:19
我们是用甲醇溶解的，流动相起始比例是乙腈-磷酸水（5:95），后来我们试了用水、流动相、50%甲醇溶解都没有前面那个峰，但这个什么原因呢？问了安捷伦工程师说是溶剂效应造成的，这样解释能解释的通吗？还劳烦有经 ...

安捷伦工程师说的对，就是溶剂化效应，这种现象在溶解对照品所用的溶剂与你流动相的起始比例极性相差很大的情况下，很容易出现，所以一般建议用流动相配制对照品，你的流动相起始比例是乙腈-磷酸水（5:95），如果用甲醇溶解样品，就不是特别合适
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10楼2016-06-28 10:02:27
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