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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 反转录pcr新合成的cDNA末端会带五个G吗
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kaili-007

新虫 (小有名气)

[求助] 反转录pcr新合成的cDNA末端会带五个G吗

如题，因为要做pcr改良，所以需要知道mRNA逆转录成cDNA时逆转录酶是不是会在3末端加上5个G

@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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人生是一场修行
1楼 2016-06-22 14:25:24
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jianguochen

新虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-24 00:04:35
这个看你用的哪种逆转录酶了。
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kaili-007
2楼2016-06-22 17:45:43
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kaili-007

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jianguochen at 2016-06-22 17:45:43
这个看你用的哪种逆转录酶了。

你知道有哪些酶是可以在3末端加五个G的吗

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人生是一场修行
3楼2016-06-22 18:34:11
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kaili-007

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jianguochen at 2016-06-22 17:45:43
这个看你用的哪种逆转录酶了。

求告知。。。

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人生是一场修行
4楼2016-06-22 18:34:40
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jianguochen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kaili-007 at 2016-06-22 18:34:11
你知道有哪些酶是可以在3末端加五个G的吗
...

加5个G的没用过，单细胞SMART-seq用的MMLV可在末端加3个C，或许有其他逆转录酶能满足你的需求吧。如果没得选择，又一定要加G，或许可以用末端转移酶。
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5楼2016-06-23 12:38:21
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kaili-007

新虫 (小有名气)
哦哦，那应该是要加C的，但不是应该有五个C吗。只需要一种反转录酶能够在3末端加上已知的序列就可以

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人生是一场修行
6楼2016-06-23 19:35:52
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