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tammy1211

铜虫 (初入文坛)

[求助] 40微升连接产物转入100微升的商业化感受态细胞 已有2人参与

40微升连接产物转入100微升的商业化感受态细胞,然后涂板,对后续克隆效率有多大的影响?
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mooc
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biocherry

铁虫 (正式写手)

4楼2016-06-22 18:12:25
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是电转还是化转?克隆效率,是做对照,才能知道的。别人实验室做的高,你不一定也高,所以要做对照。
2楼2016-06-21 22:05:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
连接产物太多了,配置感受态细胞的缓冲液里一般都有些Ca2+, Mg2+, Ru2+之类的二价离子,缓冲液的离子浓度对转化效率很重要。连接产物本身也有缓冲液,加得太多了反而会降低转化效率
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2016-06-22 06:54:54
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

太多了,最多35ul啦,不要超过1/3的感受态的体积啦。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-06-23 22:33:52
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