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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 40微升连接产物转入100微升的商业化感受态细胞
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tammy1211

铜虫 (初入文坛)

[求助] 40微升连接产物转入100微升的商业化感受态细胞 已有2人参与

40微升连接产物转入100微升的商业化感受态细胞，然后涂板，对后续克隆效率有多大的影响？
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mooc
1楼 2016-06-21 16:19:27
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是电转还是化转？克隆效率，是做对照，才能知道的。别人实验室做的高，你不一定也高，所以要做对照。
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2楼2016-06-21 22:05:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
连接产物太多了，配置感受态细胞的缓冲液里一般都有些Ca2+, Mg2+, Ru2+之类的二价离子，缓冲液的离子浓度对转化效率很重要。连接产物本身也有缓冲液，加得太多了反而会降低转化效率
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2016-06-22 06:54:54
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biocherry

铁虫 (正式写手)
太多了哦

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4楼2016-06-22 18:12:25
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)
太多了，最多35ul啦，不要超过1/3的感受态的体积啦。

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5楼2016-06-23 22:33:52
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
简单的方法，分两个20ul，转两管100ul的感受态

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6楼2016-06-23 22:35:03
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Quorra

新虫 (初入文坛)
我们都是加10微升

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7楼2016-06-25 22:54:47
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