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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-06-25 19:00:50
体系怎么配的?酶和模板都加了多少?

楼主已成功解决,在楼下分享一下经验。

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11楼2016-07-08 09:15:02
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 少文329 at 2016-07-01 10:39:40
我也是同样得问题,我的质粒16Kb

楼主成功解决,楼下分享一下经验。

发自小木虫IOS客户端
12楼2016-07-08 09:15:40
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

13楼2016-07-08 09:19:35
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by kaoyanjiu at 2016-07-08 09:19:35

我用的takara的Primerstar酶,体系是50ulul。跑了很多次,都出现点样孔凝集,高条带扩散的现象,模板是试剂盒提取的质粒,4.5kbp的大小。这是我的体系,第二栏的0.2X是我把模板稀释了5倍后跑的一个体系,跑出来结果比1X好点,用0.2X体系跑出来后消化转化提质粒送测序发现突变点成功改回来,PCR的结果其实就是这样,目的条带不多不亮但确实有,可能还有扩增条件的问题不佳等。中间泳道就是0.2X,左右是没有稀释的。
做的定点突变PCR,可跑的带总是成这样,凝集在点样孔是怎么回事-1



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14楼2016-07-08 09:26:11
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少文329

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by kaoyanjiu at 2016-07-08 09:15:40
楼主成功解决,楼下分享一下经验。
...

楼主能否说一下具体是哪个酶,引物浓度是多少,还有模板用量,谢谢了!顺便能不能说一下引物设计原则,万谢!!!

发自小木虫Android客户端
15楼2016-07-08 11:28:32
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少文329

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by kaoyanjiu at 2016-07-08 09:11:52
楼主已成功解决,不是点错的低级错误。
...

楼主可否分享一下经验,我的一直还是这种情况啊,拜托了!!!
16楼2016-08-08 15:58:27
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子不知

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by kaoyanjiu at 2016-07-08 09:11:52
楼主已成功解决,不是点错的低级错误。
...

求教,是哪里出现了问题,怎么解决的呢?
17楼2017-06-20 16:11:44
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zai4109

新虫 (正式写手)

18楼2019-05-31 01:11:43
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

引用回帖:
10楼: Originally posted by kaoyanjiu at 2016-07-08 09:11:52
楼主已成功解决,不是点错的低级错误。
...

怎么解决了
19楼2019-06-04 18:57:44
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