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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

[交流] 做的定点突变PCR,可跑的带总是成这样,凝集在点样孔是怎么回事 已有8人参与

我的模板是重组后的质粒,做的定点突变PCR,可跑出来总是这样,点样孔凝集,而且还拖尾。

做的定点突变PCR,可跑的带总是成这样,凝集在点样孔是怎么回事


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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-06-25 08:48:54
不知道你PCR体系中有什么了,不行稀释一下跑胶。
2楼2016-06-21 09:40:20
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-06-21 09:40:20
不知道你PCR体系中有什么了,不行稀释一下跑胶。

ok。

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3楼2016-06-21 09:51:43
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hattie919822

银虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:42:34
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:49:00
会不会是模板提取时没有很纯,掺杂蛋白,分子量太大,跑不出胶孔.
不见不知不伴不惜不
4楼2016-06-21 13:21:55
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hattie919822 at 2016-06-21 13:21:55
会不会是模板提取时没有很纯,掺杂蛋白,分子量太大,跑不出胶孔.

同样的模板,我换另一种酶扩增不会出现点样孔凝集,只有引物二聚体,应该不是掺杂蛋白的原因。

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5楼2016-06-21 13:36:59
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18283565942

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-25 08:49:19
点样没有点好,样点到胶里面了,可以再试一次,点样时注意

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6楼2016-06-25 07:14:25
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)


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体系怎么配的?酶和模板都加了多少?

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7楼2016-06-25 19:00:50
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少文329

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是同样得问题,我的质粒16Kb

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8楼2016-07-01 10:39:40
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少文329

新虫 (初入文坛)

楼主解决了可以分享下经验

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9楼2016-07-01 10:39:59
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 18283565942 at 2016-06-25 07:14:25
点样没有点好,样点到胶里面了,可以再试一次,点样时注意

楼主已成功解决,不是点错的低级错误。

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10楼2016-07-08 09:11:52
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