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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做的定点突变PCR，可跑的带总是成这样，凝集在点样孔是怎么回事
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

[交流] 做的定点突变PCR，可跑的带总是成这样，凝集在点样孔是怎么回事 已有8人参与

我的模板是重组后的质粒，做的定点突变PCR，可跑出来总是这样，点样孔凝集，而且还拖尾。

做的定点突变PCR，可跑的带总是成这样，凝集在点样孔是怎么回事


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1楼 2016-06-20 18:37:58
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-06-25 08:48:54
不知道你PCR体系中有什么了，不行稀释一下跑胶。
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2楼2016-06-21 09:40:20
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-06-21 09:40:20
不知道你PCR体系中有什么了，不行稀释一下跑胶。

ok。

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3楼2016-06-21 09:51:43
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hattie919822

银虫 (初入文坛)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:42:34
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:49:00
会不会是模板提取时没有很纯,掺杂蛋白,分子量太大,跑不出胶孔.
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不见不知不伴不惜不
4楼2016-06-21 13:21:55
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hattie919822 at 2016-06-21 13:21:55
会不会是模板提取时没有很纯,掺杂蛋白,分子量太大,跑不出胶孔.

同样的模板，我换另一种酶扩增不会出现点样孔凝集，只有引物二聚体，应该不是掺杂蛋白的原因。

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5楼2016-06-21 13:36:59
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18283565942

新虫 (初入文坛)
★ ★
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-25 08:49:19
点样没有点好，样点到胶里面了，可以再试一次，点样时注意

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6楼2016-06-25 07:14:25
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
★
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体系怎么配的？酶和模板都加了多少？

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7楼2016-06-25 19:00:50
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少文329

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也是同样得问题，我的质粒16Kb

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8楼2016-07-01 10:39:40
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少文329

新虫 (初入文坛)
楼主解决了可以分享下经验

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9楼2016-07-01 10:39:59
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 18283565942 at 2016-06-25 07:14:25
点样没有点好，样点到胶里面了，可以再试一次，点样时注意

楼主已成功解决，不是点错的低级错误。

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10楼2016-07-08 09:11:52
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