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定点突变一个氨基酸，连接到表达载体上测序，发现变回了突变前的序列了
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| 重叠PCR做定点突变，序列先连接到T载体上，测序正确，然后连接到表达载体30a上，测序发现突变点变回了没突变前的。重新测序连接T的质粒，确定是突变了，然后重新连接30a，仍然变回原来的序列。有没有人遇到这样的情况，要怎么解决？求大神帮助。 |
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