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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切时, 加酶量占到了总体积的15%,酶切结果会怎样
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切时, 加酶量占到了总体积的15%,酶切结果会怎样

酶切时, 加酶量占到了总体积的15%, 严重超过了10%的标准! 酶切结果会怎样?
[search]酶切[/search]
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1楼 2008-11-06 13:57:07
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liumikewolf

金虫 (小有名气)
请大家一起分析一下，如果有类似经验的虫友，也请和大家分享
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2楼2008-11-06 14:11:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
酶保存在甘油里头，甘油会影响酶切
很可能引起星号活性
所以，就会乱切
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3楼2008-11-06 15:48:31
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liujun_yan

银虫 (初入文坛)
主要还是看你能不能充分混匀，不知道你为什么会加这么多酶，是DNA纯度不高切不动么？？
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4楼2008-11-06 16:15:45
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
酶的保存液里含有甘油，如果加入的酶量超过反应体积的10%会因甘油量大而引起星号活性。建议楼主增大反应体积。呵呵
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
5楼2008-11-06 16:24:49
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月月大可

木虫 (著名写手)
反应体系中甘油的含量超过5%的时候就会影响酶切效果。平常用的商品化酶中甘油的含量为50%，所以反应体系中酶的总量最好不要超过10%。
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6楼2008-11-06 16:30:31
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