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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切时, 加酶量占到了总体积的15%,酶切结果会怎样

酶切时, 加酶量占到了总体积的15%, 严重超过了10%的标准! 酶切结果会怎样?
[search]酶切[/search]
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

请大家一起分析一下,如果有类似经验的虫友,也请和大家分享
2楼2008-11-06 14:11:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

酶保存在甘油里头,甘油会影响酶切
很可能引起星号活性
所以,就会乱切
3楼2008-11-06 15:48:31
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liujun_yan

银虫 (初入文坛)


主要还是看你能不能充分混匀,不知道你为什么会加这么多酶,是DNA纯度不高切不动么??
4楼2008-11-06 16:15:45
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

酶的保存液里含有甘油,如果加入的酶量超过反应体积的10%会因甘油量大而引起星号活性。建议楼主增大反应体积。呵呵
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
5楼2008-11-06 16:24:49
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月月大可

木虫 (著名写手)

反应体系中甘油的含量超过5%的时候就会影响酶切效果。平常用的商品化酶中甘油的含量为50%,所以反应体系中酶的总量最好不要超过10%。
6楼2008-11-06 16:30:31
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