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筱筱溪

金虫 (著名写手)

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专业: 金属功能材料

[交流] 关于研样的用条件探索

待磨样1：葡萄幼叶
1  用直径6~8mm打孔器在叶片合适的部位打孔，获取研磨材料叶圆片。
2  将5~6颗直径为3mm研磨珠和若干（8片）叶圆片放置于2ml离心管（EP管）中。
3  将加完叶圆片和研磨珠的EP管，在适配器上摆好，开盖，加液氮冷冻；3~5分钟后，待叶圆片在冷冻的情况下脱去水分，及时将EP管的盖封闭上，继续在液氮中遇冷3分钟。
4  需素将适配器安置到研磨仪上。
5  1500rpm条件下，研磨3分钟，可得到细碎的叶片粉末，用于提核酸或蛋白。（研磨时间和转速还可以进一步优化）
同样的方法对冻存的葡萄叶片，研磨时加入1~2颗5mm的珠子，效果也非常好！
待磨样2：白菜叶片（冰箱冻存）
1  分装珠子并标号：内侧两排装1颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排6~7颗3mm珠子。在2ml离心管的侧壁和盖上分别编号，使其与样品对应好。
2  冻存样品白菜叶片分装：按照对应关系，将冻存样品迅速装入离心管内，并盖上盖子，以防止吸潮。为了使提取物浓度一致，尽量在分装时保证每管内的样品量均一。注意样品不得超过总体积的三分之一，样品尽量保持松弛状态，不能压在一起，以免冻成一坨。
3  冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。
4  转速与时间设定：1500转  2min
5  研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。
6  取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。
待磨样3：水稻叶片（冰箱冻存）
1  将离心管编号，对应编号将相应的水稻叶片截成1cm左右的小段，每个离心管中放3段，用镊子夹住中间位置，放入管底。
2  分装珠子：内侧两排装2颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排装1颗5毫米珠子和6颗3mm珠子。
3  冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。
4  转速与时间设定：1500转/分钟  3min
5  研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。
6  取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。
以上是我们对于这类样品研磨总结出的条件方法，希望能对大家有所帮助，也希望各位如果有更好的方法留言给我，非常感谢！

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