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关于研样的用条件探索
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待磨样1：葡萄幼叶 1 用直径6~8mm打孔器在叶片合适的部位打孔，获取研磨材料叶圆片。 2 将5~6颗直径为3mm研磨珠和若干（8片）叶圆片放置于2ml离心管（EP管）中。 3 将加完叶圆片和研磨珠的EP管，在适配器上摆好，开盖，加液氮冷冻；3~5分钟后，待叶圆片在冷冻的情况下脱去水分，及时将EP管的盖封闭上，继续在液氮中遇冷3分钟。 4 需素将适配器安置到研磨仪上。 5 1500rpm条件下，研磨3分钟，可得到细碎的叶片粉末，用于提核酸或蛋白。（研磨时间和转速还可以进一步优化） 同样的方法对冻存的葡萄叶片，研磨时加入1~2颗5mm的珠子，效果也非常好！ 待磨样2：白菜叶片 （冰箱冻存） 1 分装珠子并标号：内侧两排装1颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排6~7颗3mm珠子。在2ml离心管的侧壁和盖上分别编号，使其与样品对应好。 2 冻存样品白菜叶片分装：按照对应关系，将冻存样品迅速装入离心管内，并盖上盖子，以防止吸潮。为了使提取物浓度一致，尽量在分装时保证每管内的样品量均一。注意样品不得超过总体积的三分之一，样品尽量保持松弛状态，不能压在一起，以免冻成一坨。 3 冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。 4 转速与时间设定：1500转 2min 5 研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。 6 取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。 待磨样3：水稻叶片 （冰箱冻存） 1 将离心管编号，对应编号将相应的水稻叶片截成1cm左右的小段，每个离心管中放3段，用镊子夹住中间位置，放入管底。 2 分装珠子：内侧两排装2颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排装1颗5毫米珠子和6颗3mm珠子。 3 冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。 4 转速与时间设定：1500转/分钟 3min 5 研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。 6 取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。 以上是我们对于这类样品研磨总结出的条件方法，希望能对大家有所帮助，也希望各位如果有更好的方法留言给我，非常感谢！ |
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