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625351163

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助基因连接方面的问题

用来培养重组子的LB培养基连杂菌都不长,是不是哪里出了问题?希望热心人士伸出援手,先谢谢啦!
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

哪有长杂菌的,你是转化鉴定成功了么?还是保存的菌株?不长可能抗生素用错了

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2楼2016-06-20 10:05:56
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625351163

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-06-20 10:05:56
哪有长杂菌的,你是转化鉴定成功了么?还是保存的菌株?不长可能抗生素用错了

我一直在做连接,抗生素是载体中的,并没有错,我反复做了很多次,一直长不出来,后来我直接把平板放在空气中,放了很久,近一个礼拜,还是干净得很,所以我怀疑是不是培养基有问题
3楼2016-06-21 20:54:39
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 625351163 at 2016-06-21 20:54:39
我一直在做连接,抗生素是载体中的,并没有错,我反复做了很多次,一直长不出来,后来我直接把平板放在空气中,放了很久,近一个礼拜,还是干净得很,所以我怀疑是不是培养基有问题...

可能真的培养基有问题吧,你可以不加抗生素,看看长不长~

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4楼2016-06-21 22:25:15
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

实验方法全部重新检查一下,配制试剂也检查一下。

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5楼2016-07-07 12:11:22
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不爱做实验

银虫 (正式写手)

1、每个环节都更换新的试剂重新做一次
2、连接体系和连接效率问题或者根本没连接上
3、构建时,片段和载体的回收效率很重要
6楼2016-07-07 14:29:27
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