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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 求助基因连接方面的问题
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625351163

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助基因连接方面的问题

用来培养重组子的LB培养基连杂菌都不长，是不是哪里出了问题？希望热心人士伸出援手，先谢谢啦!
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1楼2016-06-17 08:38:07
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yvonne9044

新虫 (正式写手)
哪有长杂菌的，你是转化鉴定成功了么？还是保存的菌株？不长可能抗生素用错了

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2楼2016-06-20 10:05:56
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625351163

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-06-20 10:05:56
哪有长杂菌的，你是转化鉴定成功了么？还是保存的菌株？不长可能抗生素用错了

我一直在做连接，抗生素是载体中的，并没有错，我反复做了很多次，一直长不出来，后来我直接把平板放在空气中，放了很久，近一个礼拜，还是干净得很，所以我怀疑是不是培养基有问题
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3楼2016-06-21 20:54:39
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yvonne9044

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 625351163 at 2016-06-21 20:54:39
我一直在做连接，抗生素是载体中的，并没有错，我反复做了很多次，一直长不出来，后来我直接把平板放在空气中，放了很久，近一个礼拜，还是干净得很，所以我怀疑是不是培养基有问题...

可能真的培养基有问题吧，你可以不加抗生素，看看长不长～

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4楼2016-06-21 22:25:15
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mlxmiao

木虫 (著名写手)
实验方法全部重新检查一下，配制试剂也检查一下。

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5楼2016-07-07 12:11:22
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
1、每个环节都更换新的试剂重新做一次
2、连接体系和连接效率问题或者根本没连接上
3、构建时，片段和载体的回收效率很重要
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6楼2016-07-07 14:29:27
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