| 查看: 3318 | 回复: 3 | ||
[求助]
启动子载体构建求教
|
本人已经克隆出了启动子序列，有1820bp，包含了CDS序列后面120个碱基，现在想构建启动子表达载体，想用的载体是pcambia1305.1。现在有两个问题想请教：1、启动子表达载体构建时是否要包含5`UTR？如果需要，多长为好，还是需要起始密码子前面的都需要？2、构建载体为pcambia1305.1，但是这个载体下游引物的酶切位点只有NocI和Bgl II。由于我的启动子序列里面包含有NocI，只能选择Bgl II，但是它在GUS基因的第3个密码子上，如果选用它是不是会破坏掉GUS基因的表达（后期我需要测CUS酶活）。 (}XB~JGCH@TXSR]_JJ$EOAU.png |
回复此楼» 猜你喜欢
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有11人回复
-
自荐读博
已经有5人回复
-
求个博导看看
已经有16人回复
-
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有4人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
-
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）
已经有3人回复
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2016-10-31 22:13:30
|
克隆启动子不应该是ATG前面2000bp左右吗？当然包括5｀UTR，最好报告ATG后的100到200bp.第二个问题，如果知道载体序列，可以用NEB的一步PCR法构建载体，而不需要考虑酶切位点问题。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-11-01 23:15:52
4楼2018-08-30 19:36:20