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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 帮忙看看我的RT-PCR怎么了

最近在做RT-PCR,条带够亮但老是偏短,PCR产物拿去测序,两次都失败了。说是有重叠峰出现。请教高人该怎么办?xdjm帮忙分析一下。不胜感激。
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

做克隆之后再测序看看会不会好点
2楼2008-11-05 22:49:31
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

你的意思是用T载体?
3楼2008-11-06 09:12:24
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77747759

金虫 (正式写手)

与国同庆

打电话到测序公司去问 具体的情况,再做打算
也许他们测出了一部分
你叫他们发给你看看
看看有你要的比原来设计片段中的一部分?
4楼2008-11-08 12:06:02
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77747759

金虫 (正式写手)

与国同庆

公司的MM或GG会建议你的方法
他们的方法比我们的 建议好用
我不知道你纯化了没有纯化
如果没纯化估计是PCR产物不纯,可以纯化后再送出去测序
5楼2008-11-08 12:15:16
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


司马诸葛(金币+1,VIP+0): 8-8 17:41
一般来说PCR产物直接测效果不大好
最简单的方法还是克隆到T载体上面再测
6楼2008-11-08 12:54:15
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sj_wu

金虫 (正式写手)

连接后测序
7楼2008-11-08 13:11:22
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

恩,谢谢大家这么热心,我想最好也只有连T载体测序了
8楼2008-11-08 22:43:21
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veronica5129

铜虫 (初入文坛)

我做RT-PCR,主要是研究选择性剪接,一直不是很顺利,目前得到一片段,已经连到T载体进行测序了,等待结果中,所以还是建议你连到T载体上试试
性格决定命运
9楼2008-11-10 17:25:52
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