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易农植保

新虫 (初入文坛)

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[求助] 农杆菌介导的转化实验若干问题已有1人参与

各位大神，今天做农杆菌介导转化大丽轮枝菌实验问题，其中用到IM和MM两种培养基，不同的文献感觉配方各有差异，不知道有没有哪位成功做过的给一个配方，另外，配制的时候添加顺序是什么？
我们实验室用的配方是：
MM：葡萄糖2g，KH2PO4 1.45g，K2HPO4 2.05g，NH4NO3 0.5g，CaCl2 0.01g，MgSO4.7H2O 0.6g，NaCl 0.3g，5ml Z-Salts（10ml Z-Salts包含：ZnSO4.7H2O 0.001g，CuSO4.5H2O 0.001g，H3BO4 0.001g，(NH4)2SO4 0.5g，MnSO4.H2O 0.001g，NaMoO4.H2O 0.001g），用HCl调pH至6.7-7.0.
IM：5ml Z-Salts，98%MES 8.7g，葡萄糖2g，甘油5g，乙酰丁香酮AS 200μM，用HCl调pH至5.4；
不知道配方有没有问题，另外，MM配制的时候，添加顺序怎么加，我一起加进去的时候全是混浊的了，还有就是MES能一起加到培养基灭菌吗？还是和AS一样过滤灭菌？谢谢

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