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易农植保

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌介导的转化实验若干问题 已有1人参与

各位大神,今天做农杆菌介导转化大丽轮枝菌实验问题,其中用到IM和MM两种培养基,不同的文献感觉配方各有差异,不知道有没有哪位成功做过的给一个配方,另外,配制的时候添加顺序是什么?
我们实验室用的配方是:
MM:葡萄糖2g,KH2PO4 1.45g,K2HPO4 2.05g,NH4NO3 0.5g,CaCl2 0.01g,MgSO4.7H2O 0.6g,NaCl 0.3g,5ml Z-Salts(10ml Z-Salts包含:ZnSO4.7H2O 0.001g,CuSO4.5H2O 0.001g,H3BO4 0.001g,(NH4)2SO4 0.5g,MnSO4.H2O 0.001g,NaMoO4.H2O 0.001g),用HCl调pH至6.7-7.0.
IM:5ml Z-Salts,98%MES 8.7g,葡萄糖2g,甘油5g,乙酰丁香酮AS 200μM,用HCl调pH至5.4;
不知道配方有没有问题,另外,MM配制的时候,添加顺序怎么加,我一起加进去的时候全是混浊的了,还有就是MES能一起加到培养基灭菌吗?还是和AS一样过滤灭菌?谢谢
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摸摸头515

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我也在做大丽轮枝菌的转化,也遇到了同样的问题,请问你现在的问题解决了吗?我现在的转化出来的转化子都不正常,很是费解。。。
生命的奇迹在于自己去创造!
2楼2017-06-28 10:04:50
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