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wuwanghua

新虫 (初入文坛)

[求助] 新人求问关于抗原抗体的相互作用问题----我的抗体是不是出现问题了呀???? 已有1人参与

实验新人,对抗体领域不太了解,求问抗体是不是受到缓冲液的影响很大,缓冲液中有10mM的镁离子等,具体如下:
我想做修饰有Dig的DNA和Anti-Digoxin antibody 相互作用来实现信号的变化,结果发现有无Anti-Digoxin antibody体系的信号并不发生变化,我的体系基本原理是可行的,也通过修饰有生物素的DNA和链霉亲合素的体系得到验证(该体系加与不加链霉亲合素是有信号变化的)。
我的体系是在37℃条件下的,Anti-Digoxin antibody买的是GeneTex的一抗, Anti-Digoxin mouse monoclonal antibody,200ul  0.5mg/ml,我用1*PBS进行稀释使用并将其加入到体系中进行测定,我的体系的buffer的组成为:50 mM 醋酸钾   20 mM Tris-acetate    10 mM 醋酸镁    100 μg/ml BSA pH  7.9 @ 25°C,不知道为什么生物素-链霉亲合素体系可行而Dig和Anti-Digoxin antibody的抗原抗体体系却行不通??
我处理Anti-Digoxin antibody的方式有问题??  Anti-Digoxin antibody抗体坏了??  buffer中的镁离子或者离子强度使该抗体失效了???37℃是该抗原抗体作用的适宜温度???
求问各位大侠
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

【答案】应助回帖

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抗体是鼠源的,和你的标记抗体一致吗?
生命在于运动
2楼2016-06-15 15:35:06
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wuwanghua

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by swlsangon at 2016-06-15 15:35:06
抗体是鼠源的,和你的标记抗体一致吗?

没接触过这方面的,Anti-Digoxin antibody 不就是地高辛(Dig)的抗体么,Dig不就是抗原么???求解答
3楼2016-06-15 15:50:19
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