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wuwanghua

新虫 (初入文坛)

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虫号: 2327326
注册: 2013-03-07
专业: 分析仪器与试剂

[求助] 新人求问关于抗原抗体的相互作用问题----我的抗体是不是出现问题了呀？？？？已有1人参与

实验新人，对抗体领域不太了解，求问抗体是不是受到缓冲液的影响很大，缓冲液中有10mM的镁离子等，具体如下：
我想做修饰有Dig的DNA和Anti-Digoxin antibody 相互作用来实现信号的变化，结果发现有无Anti-Digoxin antibody体系的信号并不发生变化，我的体系基本原理是可行的，也通过修饰有生物素的DNA和链霉亲合素的体系得到验证（该体系加与不加链霉亲合素是有信号变化的）。
我的体系是在37℃条件下的，Anti-Digoxin antibody买的是GeneTex的一抗， Anti-Digoxin mouse monoclonal antibody，200ul 0.5mg/ml，我用1*PBS进行稀释使用并将其加入到体系中进行测定，我的体系的buffer的组成为：50 mM 醋酸钾 20 mM Tris-acetate 10 mM 醋酸镁 100 μg/ml BSApH 7.9 @ 25°C，不知道为什么生物素-链霉亲合素体系可行而Dig和Anti-Digoxin antibody的抗原抗体体系却行不通？？
我处理Anti-Digoxin antibody的方式有问题？？ Anti-Digoxin antibody抗体坏了？？ buffer中的镁离子或者离子强度使该抗体失效了？？？37℃是该抗原抗体作用的适宜温度？？？
求问各位大侠

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