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紫玉涵轩

铜虫 (小有名气)

[求助] 我的质粒是不是被污染了?怎么解决? 已有3人参与

提取质粒后跑胶有条带,酶切后什么都没有,我用质粒和新拆包装的buffer37度温育30分钟,没有加酶,条带也不见了,我的质粒是不是被污染了?怎么解决?

我的质粒是不是被污染了?怎么解决?


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zy349458068

新虫 (初入文坛)

请问你提取质粒怎么提的啊?是阳性菌的吗?
6楼2016-06-17 22:03:18
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普通回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

2楼2016-06-14 17:55:21
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-06-18 17:03:51
你用了几微升的质粒做酶切呢?酶切后又是取了几微升电泳检测呢?会不会本来质粒浓度低,检测不到?另外,胶配的也不怎么样,所有条带都是模糊的。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-06-14 18:07:31
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紫玉涵轩

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2016-06-14 17:55:21
孵育半小时是在干嘛

就是怀疑有非特异性内切酶,然后想37度孵育看看是否在镁离子存在的情况下会发生降解

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4楼2016-06-14 18:40:31
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苏莫离

新虫 (初入文坛)

建议再仔细查看试剂说明书

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5楼2016-06-14 23:18:49
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masterboyama

铁虫 (著名写手)

胶没做好,酶切的时候多做几管,一起回收了。

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7楼2016-06-18 12:28:36
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MMCCBB

新虫 (著名写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎积极发帖回应 2016-06-19 07:52:00
你加入质粒后浓度变低,没法看出来,应该再目的条带的地方估计切胶回收纯化看看

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8楼2016-06-19 00:13:57
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cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个图上没有marker吧,会不会是质粒浓度太低了,我也遇到过这种情况,质粒浓度太低,酶切后就看不见条带。
9楼2016-08-11 10:39:47
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博克多

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我刚学习,发现你的图跟我的差不了多少,但是我还不懂酶切怎么操作呢!!!!
没有最好,只有更好
10楼2016-08-18 13:21:02
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