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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 用反相填料过柱子怎么操作
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huzl

银虫 (正式写手)

[求助] 用反相填料过柱子怎么操作 已有3人参与

硅胶板分不开，只能在碳18反相柱子分开，峰刚刚能分离。
没有制备液相，打算自己买碳18的反相填料装柱子分离， 操作和硅胶柱分离是不是基本相同，有什么要注意的地方？
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1楼 2016-06-13 22:26:23
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huzl

银虫 (正式写手)
反相的碳18填料在哪里买到， 各个厂家是否差异大？
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5楼2016-06-17 16:17:35
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查看全部 5 个回答

samule1978

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甲醇装柱，尽量少溶剂溶解后上样，然后水甲醇梯度洗脱，完了后稀盐酸洗填料，干燥后保存

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-06-13 23:03:33
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hujychem

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、基本操作和硅胶柱相同，湿法装柱好些，匀浆液用甲醇。
2、流动相基本是水、有机相混合物，有机相可选择甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯，氯仿，正己烷等正相溶剂。一般C18填料怕碱，多数C18填料使用pH范围2-8。慎用三乙胺，氨水之类的改性剂。流动相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。
3、梯度洗脱从高水相开始，但有机相比例不低于5%，最好不要用纯水，有机相比例越高越容易洗脱。
4、洗脱结束用纯有机相，如纯甲醇冲洗。
5、使用后的填料不要干燥，保存在纯甲醇里。也方便下次装柱。
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3楼2016-06-14 16:37:48
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上海波粒

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
填料粒径，原则上同等价位，粒径越小越好，如果硬件都能满足使用条件的话
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4楼2016-06-16 08:45:15
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