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huzl

银虫 (正式写手)

[求助] 用反相填料过柱子怎么操作 已有3人参与

硅胶板分不开,只能在碳18反相柱子分开,峰刚刚能分离。
没有制备液相,打算自己买碳18的反相填料装柱子分离, 操作和硅胶柱分离是不是基本相同,有什么要注意的地方?
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hujychem

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、基本操作和硅胶柱相同,湿法装柱好些,匀浆液用甲醇。
2、流动相基本是水、有机相混合物,有机相可选择甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯,氯仿,正己烷等正相溶剂。一般C18填料怕碱,多数C18填料使用pH范围2-8。慎用三乙胺,氨水之类的改性剂。流动相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。
3、梯度洗脱从高水相开始,但有机相比例不低于5%,最好不要用纯水,有机相比例越高越容易洗脱。
4、洗脱结束用纯有机相,如纯甲醇冲洗。
5、使用后的填料不要干燥,保存在纯甲醇里。也方便下次装柱。
3楼2016-06-14 16:37:48
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samule1978

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
甲醇装柱,尽量少溶剂溶解后上样,然后水甲醇梯度洗脱,完了后稀盐酸洗填料,干燥后保存

发自小木虫Android客户端
2楼2016-06-13 23:03:33
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上海波粒

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
填料粒径,原则上同等价位,粒径越小越好,如果硬件都能满足使用条件的话
4楼2016-06-16 08:45:15
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huzl

银虫 (正式写手)

反相的碳18填料在哪里买到, 各个厂家是否差异大?
5楼2016-06-17 16:17:35
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