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huzl

木虫 (正式写手)

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[求助] 用反相填料过柱子怎么操作已有3人参与

硅胶板分不开，只能在碳18反相柱子分开，峰刚刚能分离。
没有制备液相，打算自己买碳18的反相填料装柱子分离，操作和硅胶柱分离是不是基本相同，有什么要注意的地方？

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1楼2016-06-13 22:26:23

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hujychem

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

1、基本操作和硅胶柱相同，湿法装柱好些，匀浆液用甲醇。
2、流动相基本是水、有机相混合物，有机相可选择甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯，氯仿，正己烷等正相溶剂。一般C18填料怕碱，多数C18填料使用pH范围2-8。慎用三乙胺，氨水之类的改性剂。流动相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。
3、梯度洗脱从高水相开始，但有机相比例不低于5%，最好不要用纯水，有机相比例越高越容易洗脱。
4、洗脱结束用纯有机相，如纯甲醇冲洗。
5、使用后的填料不要干燥，保存在纯甲醇里。也方便下次装柱。