24小时热门版块排行榜    

查看: 1149  |  回复: 2

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

[求助] 请教酶的微胶囊制备中遇到的问题 已有1人参与

有水溶性蛋白酶,最适PH值在3左右,在PH6,7,8条件下无酶活。现想将该蛋白做成微胶囊,改变其最适PH值,使微胶囊在中性条件下能够有部分酶活。具体操作步骤如下:首先用SPAN 80乳化液体石蜡,将(蛋白酶与海藻酸钠的混合液)缓慢加入液体石蜡中,搅拌1小时后,然后加入氯化钙水溶液固化微球。离心后弃去上层石蜡,下层水相中有白色沉淀,沉淀用水清洗3遍。显微镜下观察该沉淀为透明小球,将沉淀重悬后,检测酶活。
结果如图所示,最适PH值基本无变化,而且在中心条件下基本无酶活。
请问:1.微胶囊的最适PH值未发生变化是否和微球的大小有直接关系?2.是否有其他方法能使该酶在中性条件下保持部分酶活?
新手上路,希望大家多给意见!非常感谢!!!

请教酶的微胶囊制备中遇到的问题
图片1.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

397407233

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+20, 有帮助 2016-06-13 08:17:46
有以下几点意见供参考:1,微胶囊化只是给物质构建一个微观的环境,这个环境可能与周围的大环境有所不同,并不能改变物质固有的属性。您的实验中,酶的最高活性对应的pH值,不会因为微胶囊化而改变。
2,对您的试验思路,我的理解是这样的,微胶囊内部的pH应该是3,微胶囊外部的pH是6、7或者8.这样的话,您最开始配制酶溶液时就应该设定好pH值。
3,如果第2条的理解是对的,这样做的难度也是非常的大。因为你要体现出酶活性,胶囊壁就需要有一定的透性,反应物要能够进出微胶囊才行;反应物能够进出,势必水分子和其他影响pH的盐类等也会进出,这样微胶囊内外部的pH就会趋近于变成一样,酶的活性也就失去了。
4,如果第3条的理解是对的,或许好好调整微胶囊内外的渗透压会有点帮助。
2楼2016-06-12 22:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 397407233 at 2016-06-12 22:07:02
有以下几点意见供参考:1,微胶囊化只是给物质构建一个微观的环境,这个环境可能与周围的大环境有所不同,并不能改变物质固有的属性。您的实验中,酶的最高活性对应的pH值,不会因为微胶囊化而改变。
2,对您的试验 ...

1.参考过其他文献,文献中报道的关于蛋白酶的微胶囊后,其最适PH值会偏移1~2个PH单位
2.裸酶溶液是中性的,只不过是在不同PH值的反应底物溶液中反应,然后根据反应液中底物的消耗量来计算的酶活力,结果如上图所示,同样的包裹后的酶的酶活也是这么计算的
3.裸酶消耗底物后生成甲酸,,在囊化的微环境中应该是偏酸性的,而与外环境中的缓冲液交换的话,我认为投入的反应液的PH值必须要偏中性,这样反应出来的最适PH值就会发生变化了。
谢谢您的回答
3楼2016-06-13 08:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yaiqi-87 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +6 majunge000 2026-08-10 6/300 2026-08-12 20:43 by JChen2024
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见