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yaiqi-87铜虫 (小有名气)
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请教酶的微胶囊制备中遇到的问题 已有1人参与
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有水溶性蛋白酶，最适PH值在3左右，在PH6,7,8条件下无酶活。现想将该蛋白做成微胶囊，改变其最适PH值，使微胶囊在中性条件下能够有部分酶活。具体操作步骤如下：首先用SPAN 80乳化液体石蜡，将（蛋白酶与海藻酸钠的混合液）缓慢加入液体石蜡中，搅拌1小时后，然后加入氯化钙水溶液固化微球。离心后弃去上层石蜡，下层水相中有白色沉淀，沉淀用水清洗3遍。显微镜下观察该沉淀为透明小球，将沉淀重悬后，检测酶活。 结果如图所示，最适PH值基本无变化，而且在中心条件下基本无酶活。 请问：1.微胶囊的最适PH值未发生变化是否和微球的大小有直接关系？2.是否有其他方法能使该酶在中性条件下保持部分酶活？ 新手上路，希望大家多给意见!非常感谢！！！  图片1.jpg |
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【答案】应助回帖
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yaiqi-87: 金币+20, ★有帮助 2016-06-13 08:17:46
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有以下几点意见供参考：1，微胶囊化只是给物质构建一个微观的环境，这个环境可能与周围的大环境有所不同，并不能改变物质固有的属性。您的实验中，酶的最高活性对应的pH值，不会因为微胶囊化而改变。 2，对您的试验思路，我的理解是这样的，微胶囊内部的pH应该是3，微胶囊外部的pH是6、7或者8.这样的话，您最开始配制酶溶液时就应该设定好pH值。 3，如果第2条的理解是对的，这样做的难度也是非常的大。因为你要体现出酶活性，胶囊壁就需要有一定的透性，反应物要能够进出微胶囊才行；反应物能够进出，势必水分子和其他影响pH的盐类等也会进出，这样微胶囊内外部的pH就会趋近于变成一样，酶的活性也就失去了。 4，如果第3条的理解是对的，或许好好调整微胶囊内外的渗透压会有点帮助。 |
2楼2016-06-12 22:07:02
yaiqi-87
铜虫 (小有名气)
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3楼2016-06-13 08:30:04