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glorywinter

金虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌用什么染料染色可以区分活的和死的菌落? 已有2人参与

想请教各位,长在固体平板培养基上的大肠杆菌,在不挑取菌落涂载玻片的情况下,用什么染料直接染色可以区分活的和死的菌落?(各位帮帮忙,不是微生物专业的。
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勤思好问
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
glorywinter: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-06-08 17:52:26
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂,生成蓝色的formazan结晶,formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞中琥珀酸脱氢酶消失,不能将MTT还原),故不显色。用美蓝与碱性品红的复合染料也可用于区分死菌。染色后,活菌染为蓝色,死菌和培养基偏红,在显微镜下很好区分。碱性品红用乙醇加热溶解,过滤,按1:10左右加入,可以根据情况适当调整到可以区分活菌和培养基即可。这是抗菌素发酵中检查是否染菌的常用方法。
6楼2016-06-08 17:20:12
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