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glorywinter金虫 (正式写手)
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大肠杆菌用什么染料染色可以区分活的和死的菌落？ 已有2人参与
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想请教各位，长在固体平板培养基上的大肠杆菌，在不挑取菌落涂载玻片的情况下，用什么染料直接染色可以区分活的和死的菌落？（各位帮帮忙，不是微生物专业的。 ） |
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2楼2016-06-08 13:36:42
glorywinter
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5楼2016-06-08 17:00:14
liygmail
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【答案】应助回帖
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| MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原），故不显色。用美蓝与碱性品红的复合染料也可用于区分死菌。染色后，活菌染为蓝色，死菌和培养基偏红，在显微镜下很好区分。碱性品红用乙醇加热溶解，过滤，按1：10左右加入，可以根据情况适当调整到可以区分活菌和培养基即可。这是抗菌素发酵中检查是否染菌的常用方法。 |
6楼2016-06-08 17:20:12
glorywinter
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7楼2016-06-08 18:00:01
