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110147加油

金虫 (小有名气)

[求助] MIC实验----96 孔板微量稀释法(刃天青作指示剂) 已有1人参与

先将 100 μL 指示剂溶液(750 μg/mL 的刃天青溶液)放置在 96 孔板的第 11 列(空白对照孔)。将 7.5 mL 指示剂溶液与 5 mL 的待测菌液(1×10 8 CFU/mL)混合,接着转移 100 μL 混合液到 1 至 10 列(样品测试孔)和第 12 列(生长对照孔)板孔中。加入 100 μL 待测样品溶液到第 1 列孔中,混匀后从第 1 列取出 100 μL 转移到第2 列,用同样的方法直到第 10 列,第 10 列取出的 100 μL 丢掉。最后,将加好样品的96 孔板放入恒温培养箱。
对于这个方案我有几个问题想请教一下,第一是对于指示剂和待测菌液的配比是怎么得到这个比例的;第二是用96孔板是一个空加1:1的两者,我想请问如果我的抑菌物质抑菌性没那么强,我能加大抑菌物质的浓度吗?在怎样一个范围才可以;第三是如果用24孔板或者12孔板,这些有事做什么的?谢谢!请大家教教我!@天使托
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alice姐姐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

第二个问题,可以增加药物浓度,具体你可以参考CLSI的文件,有相关的梯度稀释方案。
4楼2016-07-18 22:02:11
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110147加油

金虫 (小有名气)

我开始做的是抑菌圈的,一直抑菌效果断断续续的,我想应该是我对浓度的把控不准确,我做抑菌圈是第一层无菌培养基打底,第二层 20ml含200微的待测菌(10的8次方)同时放牛津杯,待凝固,然后拔掉牛津杯,加入200微抑菌物质

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-06-01 20:52:59
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110147加油

金虫 (小有名气)

3楼2016-06-01 20:53:20
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th13336225

新虫 (小有名气)

你好,我想问一下,你用96孔法测抑菌效果,最后是测量OD值吗,然后需要怎样处理,最终得到MIC的
5楼2016-08-17 19:41:34
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