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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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那片碧海蓝天

铁杆木虫 (正式写手)

金世纪

[求助] 基因工程菌问题 已有1人参与

我们采用基因工程菌中试,前2个月是好的,3个月以后菌株可能质粒丢失了,中试也过不去~~
主要以下现象:1)菌株显微镜下镜检变球状,先前是大肠,短杆状。
              2)有的菌株显微镜下镜检变粗杆菌,好像长胖了。
              3)以上两种菌发酵进行不下去,要么死了,要么全变球菌,无效价。
请问各位大侠,这是菌株质粒丢失了吗?
若是,我们如何做?或如何挽回?

我们可以从原始菌株里提取质粒重新转化感受态吗?

或者我们从发酵液分离菌体出来重新提取质粒,再转化宿主感受态,筛选出正常菌株?这样可以吗?
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谦虚谨慎!
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个检验质粒是否丢失应该比较简单吧,你们首先可以将原始菌种在抗性平板上画单菌落纯化,然后挑取单菌落到抗性培养基中培养,提取质粒做一下验证,这样既可以活化菌株又可以验证质粒是否丢失。一般发酵出现问题我们都是先单菌落纯化培养,重新挑取菌种进行发酵,看是否正常,另外发酵过程中是否会出现污染等情况呢?最后的选择当然是可以将质粒重新转化表达的,但发酵条件应该实验下,看是否需要重新优化,祝好。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-06-01 21:37:00
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