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PCR一直跑不出来，排除了该排除的原因了还是跑不出来已有7人参与
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| 我最近在提取黑曲霉基因组DNA，克隆特定的葡萄糖氧化酶基因，但我的菌株是菌种保藏中心购买的标准菌株，不是克隆我需要的特定基因的特定菌株，我开始提的RNA，再反转录成CDNA跑PCR,退火温度跑的是55-65℃的梯度，用的10微升体系，没跑出来，后来又提的DNA,同样是跑的温度梯度，我需要的目的基因是1818bp，所以用的是高保真酶，引物也设计了好几对了，都是公司帮设计的，应该没问题，CDNA和DNA的浓度以及OD值都正常，但是不管用什么方法都跑不出来，求大神啊，真不知道该怎么办了，试验就卡在第一步了，好焦心呐！！！！！电泳图上除了marker就什么都没有了，有时候有引物二聚体 |
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tangbowen
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9楼2016-06-02 11:57:02