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如何做磷酸化氨基酸位点的突变?求大神指点! 已有1人参与
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想研究肿瘤细胞中某个兴趣蛋白A干扰后(功能已经验证)是否影响下游蛋白B的磷酸化,有文献报道B 的T423磷酸化可以引起我们验证的功能改变,我想把肿瘤细胞中B蛋白423的T进行突变后看功能表型是否回复,这个怎么做?很困难吗(从没做过这方面实验,需要多长时间能掌握)?请虫友不吝指教! 另:A干扰后B蛋白WB出现了double bands(其中一条保持原位,另一条稍向上移动),我猜想这与磷酸化有关,不知道这个想法是主要因素吗?还应该考虑什么问题? Snap1.jpg@wizardfan@youlinglyw@biostar2009 |
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