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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请教一个问题，关于HPLC
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cloudwindy

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教一个问题，关于HPLC

各位大虾：
   本人最近在做一个产品的HPLC分析时出现了一个非常奇怪的问题。我采用进样量为5微升时，出峰时间5.1~5.2，出来一个很好的单峰。当加大进样量到10微升，奇怪的事情出来了，在4.9开始出峰，一直出峰到5.2分钟，并且出现双峰（肩峰）。继续加大进样量，居然从4.7分钟开始出峰，出现三个峰，而且这种现象可以重复。我采用的流动相：甲醇：水=70：30。这应该对我的产品不会有分解作用。请教各位你们遇到过这种情况么？大家帮忙分析一下。
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1楼 2008-11-03 13:43:12
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cloudwindy

铜虫 (小有名气)
感谢大家的回答，我个人觉得不会是柱子本身的问题，因为这些结果可以不断重复。我想如果柱子本身的问题在每个进样量都会出现分叉吧。

我们液相的检测限很高，平时峰高有1000mv左右的，这次20微升才到200mv左右，并且肩峰是左边矮右边高。

不知该怎么解释。
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9楼2008-11-04 16:10:22
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leonard187

木虫 (著名写手)
★
佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助~
会不会因为进样量大导致的？保留时间（按峰的最高点计）是不是一致？如果是那似乎应该是量导致的风变宽，比较类似制备HPLC的超载。不过10微升应该不会差那么多吧。听听大家意见。
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燃烧的冰
2楼2008-11-03 15:05:58
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finely

铁杆木虫 (正式写手)
★
佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助~
有可能是超载了出现了你说的肩峰现象。我有一次做的时候，因为样品里的杂质含量很低，所以要加大进样量，这时候主成分的峰就出现了肩峰，因为量太大了。你可以将进样量调小一点，走个全波长，看看峰的纯度，就可以大致看出该峰是不是包含另外的杂质的了
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3楼2008-11-03 16:02:30
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jinshanshi88

木虫 (著名写手)
★
wingcat(金币+1):谢谢应助
可能是因为柱子固定相脱落，出现不同的出峰路径造成的
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4楼2008-11-03 16:03:35
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