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我想吃饭丫

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位大神关于提取植物蛋白质的问题,谢谢啦 已有2人参与

本人在做提取植物蛋白,主要过程是用ph=7.5的PB提取蛋白,然后硫酸铵沉,沉淀直接加水复溶,透析冻干。复溶,用考马斯亮蓝法测其蛋白含量。主要面临以下几个问题:
1、我实在上清液中直接添加硫酸铵固体,使其饱和度达到80%,透析冻干后,回收蛋白较少,只有10%的蛋白被回收。分级沉得和一次加到80%所的沉淀质量差不多,具体的含量还没测,各位大神,这个怎么破?
2、冻干后的蛋白复溶性较差,含量也很少,为什么会出现这种情况?
3、蛋白的电泳图只有一条很清晰的条带,是不是意味着我的提的蛋白只有一种?
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我想吃饭丫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2016-06-01 11:31:38
萃取的不彻底。还要优化萃取的条件,硫酸氨一次加吧,分级没区别还分啥级。

之前尝试过碱提酸沉,复溶性也不好,含量也不高,Tris-Hcl也试过,提取率都不是很好。硫酸铵沉出来的物质除了蛋白还有什么呢?我衬出来的可溶性蛋白含量都很低,
4楼2016-06-01 15:34:28
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抹茶脆脆鲨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
sytucom: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励新虫参与 2016-06-01 21:13:11
我想吃饭丫(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-06-01 21:13:42
我想吃饭丫: 金币+1, 有帮助 2016-06-02 08:57:23
我觉得碱性蛋白和酸性蛋白都没有提取出来

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-06-01 06:44:30
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我想吃饭丫(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-06-01 21:13:35
我想吃饭丫: 金币+1, 有帮助 2016-06-02 08:56:41
萃取的不彻底。还要优化萃取的条件,硫酸氨一次加吧,分级没区别还分啥级。
3楼2016-06-01 11:31:38
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我想吃饭丫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 抹茶脆脆鲨 at 2016-06-01 06:44:30
我觉得碱性蛋白和酸性蛋白都没有提取出来

那你做过相关的实验吗?都用什么方法?
5楼2016-06-01 15:36:01
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