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_ao_bo

新虫 (小有名气)

[交流] 关于脂肪酶活性测试的问题

我的课题是固定化酶方面的,现在在测酶活性,用的测试方法是对硝基苯酚法,做实验的时候发现底物不好溶解,我的底物配制:A液——3mg/mL的对硝基苯棕榈酯异丙醇溶液,B液——含有1%(w/V)曲拉通100的磷酸缓冲溶液(pH=7),将A液和B液按照1:9进行混合,溶液立刻变浑浊,一直没变澄清,这样直接用于酶活测试肯定会影响紫外的吸光度。。。我上网查看到挺多人也有这个问题,有的人说超声就可以,但是我超声十分钟也没有任何变化。。然后看到有的文献是进行酶催化之后用离心分离的方法除掉沉淀再进行紫外测试,这个感觉有点繁琐,,,有没有大神知道更好的解决办法呢?急求。。。
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_ao_bo

新虫 (小有名气)

或者会不会是曲拉通的问题,因为我以前用的另一牌子的triton X-100就没有这么严重的沉淀。
3楼2016-05-30 11:11:32
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_ao_bo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fyz72 at 2016-05-30 11:10:01

如果觉得我做的实验过程有什么问题明说
4楼2016-05-30 11:13:41
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_ao_bo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fyz72 at 2016-05-30 11:10:01

有什么问题请明说 谢谢
5楼2016-05-30 11:14:48
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琉璃月028

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也做脂肪酶,但我是化学出身,刚涉猎生物方面的东西,我检测脂肪酶的活性一直是用水解三丁酸甘油酯,然后用氢氧化钠滴定,不知道你的东西是不是可以用这个方法测,但是我测出来的活性和买的酶的活性指标差好多,所以也不确定此方法准不准。
6楼2016-08-08 11:33:38
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