有谁做过反向PCR的，请教一个问题 - 生物科学 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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wangxuan

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by annwt at 11/5/08 17:14:
从你的描述看，酶切彻底。
至于扩增基因，为什么用反向PCR，是扩启动子吗？
反向PCR的关键是模板DNA的连接问题，无法检测DNA是否连接，只能是看PCR的结果。而又不知道目的片段的长度，好像是行走在黑夜里，^_^。 ...

谢谢

我要扩增一个未知基因，现在只是根据保守区扩增出中间的一段。

在其位，谋其政，成其事

11楼2008-11-05 18:04:27

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tiantianup883

铁杆木虫 (正式写手)

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pcr的模板要足

[ Last edited by tiantianup883 on 2008-11-24 at 19:31 ]

12楼2008-11-08 16:38:12

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沐风望野

铜虫 (初入文坛)

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amisking(金币+1,VIP+0): 10-8 15:50

我也是通过已知保守区域来扩增一段未知基因。现在选用反向PCR和单引物PCR的方法来做。但是目前效果很不理想。想问一下，你用反向PCR 最终做出来了吗？

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13楼2009-05-31 10:19:46

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liangopl

新虫 (初入文坛)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

我最近也在做反向PCR，但我总能跑出2条带，亮度还行。请大家帮帮忙。

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14楼2009-10-08 15:33:06

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