| 查看: 2173 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
镍柱纯化遇到点问题，请教大家 已有4人参与
|
|||
|
同一批样品分两次纯化，问题如下: 第一次上样后，用不含咪唑的洗液洗了两次每次5毫升，然后梯度洗脱，发现5毫升50mM咪唑洗下来的目的蛋白多但杂带也多 第二次纯化用不含咪唑的洗液多洗了一会，同时20mM咪唑的用量也加大了，结果50mM洗脱的杂带明显变少了但目的蛋白也少了，同时20mM下目的蛋白的量相对多了，基本和50mM洗脱的差不多了 大家结合自己的经验给点意见吧，谢谢了 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
274求调剂
已经有20人回复
-
265求调剂
已经有16人回复
-
材料与化工304求B区调剂
已经有6人回复
-
321求调剂
已经有5人回复
-
085600材料与化工306
已经有7人回复
-
085602化学工程求调剂。
已经有4人回复
-
312求调剂
已经有10人回复
-
材料考研求调剂
已经有6人回复
-
调剂推荐
已经有5人回复
-
中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培
已经有4人回复
|
洗脱液是20 50 100 250 500mM梯度的咪唑，然后50mM磷酸二氢钠和300mM氯化钠，pH8.0，这个图片是我今天摸索的纯化，就是上样后清洗充分，然后用5mL的20mM咪唑洗一遍，第四泳道50mM洗脱的，目的蛋白最多，基本上蛋白都下来了，后面就没什么蛋白了，这样的杂带能接受吗？还是继续要摸索或者换一下更好的纯化柱？我用的是IDA柱，据说NTA效果更好？ 感谢指导  发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-05-27 16:52:53
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
2楼2016-05-27 15:20:04
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
4楼2016-05-27 16:58:06
5楼2016-05-27 17:09:46
6