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蔡静蔡静

金虫 (正式写手)

[求助] 如何提高基因的扩增效率

虫友们,我最近在筛选一个可靠的内参基因,我先选了几个能作为内参的基因。本想通过RT-PCR做一个标准曲线然后得到它们的扩增效率,但是现在我得到的扩增效率却很低,而且不稳定。所以,想请教一下各位,怎样才能提高基因的扩增效率。
我用的酶是Takara的SYBR2,RT-PCR的反应体系是:SYBR:5ul、引物:0.2ul(20um)、ddH₂O:3.6ul、模板:1ul。
谢谢!
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