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wanghaitao2193铁杆木虫 (正式写手)
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[交流]
求助：新手，免疫双向扩散的问题
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我做抗体效价的时候一直没有沉淀线出现，用的是人的IgG和羊抗人。 请教大侠们，这种试验操作的关键是什么？ 我配制的PBS在室温下保存的，之前经过消毒了，按照配方配后pH本应为7.2，但是差距较大，我就用盐酸和氢氧化钠进行了pH调解，之后高压消毒。琼脂，用0.8-0.9%的生理盐水 抗原的浓度：1mg/ml 抗体由于是液体，我也不知道是否纯，应该也是配1mg/ml吧，我就取了5微升配成1ml 的PBS溶液了，之后放在湿盒中，37度水浴恒温和38度烘箱恒温都试过，仍然没有出现， 我点样的时候，取5微升，或者十微升，都不行，因为液体多了，我发现会有溢出孔德现象， 请大侠们指点迷津 哪一步关键，我做的什么地方有严重问题，导致出不了沉淀线，求答案谢谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-11-8 at 15:26 ] |
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